国际标准期刊号: 2167-0250
图莱·伊雷兹、图杰·杜姆斯
精子染色质在精子发生过程中经历结构变化,导致高度浓缩。这种核交换被认为是精子受精能力和妊娠结局的预测指标。各种研究表明男性不育与精子鱼精蛋白缺乏之间存在关系,并且有人认为它可能是精子 DNA 完整性的重要决定因素。酸性苯胺蓝染色通常与戊二醛固定一起使用,并由于精子核中的赖氨酸而对组蛋白进行染色。研究表明,精子核中组蛋白的水平与DNA损伤和不育密切相关。精子染色质浓缩表现为精子核中存在鱼精蛋白,即不存在组蛋白。在这项研究中,我们研究了当应用不同的固定方法时,苯胺蓝染色方法如何正确测定精子染色质凝聚。本研究使用了四种不同的固定剂。固定剂与戊二醛 (2.5%)、甲醇/乙酸卡尼 (3/1)、乙醇 (98%) 和甲醛 (10%) 苯胺蓝染料一起使用,如细胞学制剂中的常规浓度所示。在这些固定剂中,戊二醛广泛用于展示精子组蛋白。进行学生 T 检验和重复测量方差分析,以计算不同固定剂之间染色质凝聚(苯胺蓝阴性)率的差异。将戊二醛固定得到的染色质缩合值与甲醇和酒精固定得到的染色质缩合值进行比较,观察到统计学显着差异(p=0.014,p=0.0001)。观察到戊二醛与甲醛呈正相关(p=0.51),而戊二醛与甲醛、甲醇/乙酸和酒精固定之间呈负相关(p=0.005,p=0.0005 Ve p=0.0005,p=0.007)。染色质浓缩与精子浓度和活力呈正相关(p=0.012,p<0.001)。根据本研究获得的结果,2.5%戊二醛和10%甲醛固定适合测定苯胺蓝染色质缩合,但甲醇/乙酸和乙醇不适合此目的。