细胞科学与治疗杂志
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自体凝溶胶蛋白与外源核苷酸相结合可增强马脂肪间充质基质细胞的软骨分化 - 一项体外研究

Krzysztof Marycz、Monika Maredziak、Agnieszka Smieszek、Jakub Grzesiak 和 Anna Siudzinska

背景：如今，兽医实践涉及使用基于间充质基质细胞应用的先进疗法来治疗与软骨退化相关的疾病。用于移植的细胞的制备需要体外培养并评估其软骨形成潜力。

目的：确定源自马血清和外源核苷酸的自体凝溶胶蛋白是否可以增强马脂肪间充质基质细胞（EqASC）的代谢活性和软骨分化。

方法：从马皮下脂肪组织中分离间充质干细胞。标准生长培养基补充有1%的凝溶胶蛋白或/和0.1mg/ml的核苷酸。基于细胞毒性测定和微泡脱落分析获得的结果确定细胞的增殖活性。利用光、荧光和扫描电子显微镜评估形态学、细胞生理活性和软骨形成分化潜力。软骨形成刺激的效果通过以下方式确定：(i) 分析细胞骨架和基质蛋白的基因表达；(ii) 蛋白聚糖组织化学和 (iii) 培养物生长模式和软骨结节形成的分析。

结果：在用外源核苷酸刺激的培养物中注意到增殖活性的增强。虽然凝溶胶蛋白的添加并不影响 EqASC 的增殖，但它有助于细胞骨架的完整性。两者都研究了对软骨形成分化有积极影响的因素——凝溶胶蛋白通过稳定细胞骨架蛋白的表达，而核苷酸通过促进结节的形成。凝溶胶蛋白和核苷酸的组合增强了细胞增殖，这通过更高的细胞活性和微泡脱落来反映，并影响软骨结节的形成。

结论：自体凝溶胶蛋白和外源核苷酸在从脂肪组织中分离的间充质基质干细胞的体外培养中可以增强这些细胞的细胞完整性、增殖和软骨分化，因此可能直接影响脂肪源间充质干细胞移植的再生潜力用于马骨关节炎的治疗。