蛋白质组学与生物信息学杂志

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国际标准期刊号: 0974-276X

抽象的

山羊支原体亚种的分泌组。中性和酸性介质中的山羊草

阿曼达·沃罗斯、约翰娜·德隆尚和马赞·萨利赫

尽管支原体在某些物种中的基因组很小,但已被证明是成功的病原体。它们的简单性使它们成为了解基本代谢过程和发病机制所涉及的基因的重要工具。特别令人感兴趣的是参与支原体逃避宿主免疫反应和吞噬细胞内存活的基因。支原体在巨噬细胞的酸性和水解环境中分泌的蛋白质可能有助于揭示这组原核生物的重要毒力因子。

本研究探讨了 pH 对山羊支原体分泌组的影响。将细菌在无蛋白质培养基中培养,并研究培养物上清液中生长过程中产生的蛋白质。使用二维凝胶电泳和胰蛋白酶消化物的 MALDI-TOF 质谱来鉴定该级分中的蛋白质。

在酸性条件下,通过银染色观察到来自山羊分枝杆菌分泌体的总共 111 个蛋白点。在中性培养物上清液中检测到的斑点数量较少(82 个斑点)。两个 2D 图谱的叠加揭示了酸性 pH 条件下分泌蛋白组特有的 26 种蛋白质,但不可能识别所有点。中性蛋白的鉴定揭示了 7 种假定的脂蛋白、锌金属蛋白酶、三种肽酶、无机焦磷酸酶、烟酰胺酶/吡嗪酰胺酶和核糖体蛋白 S4 以及许多假定蛋白的存在。在酸性培养物上清液中鉴定出的蛋白质包括溶血素 A、肽蛋氨酸亚砜还原酶、两种肽酶、核苷激酶、一种脂蛋白等。API ZYM酶测定表明,酸性pH下分泌的酶谱与中性pH下相似,酸性磷酸酶、磷酸水解酶、C8酯酶脂肪酶和碱性磷酸酶的活性增强。在酸性 pH 值下突出的三种关键分泌蛋白是酸性磷酸酶、溶血素和明胶酶。

 

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