阿丁·马吕斯·瓦尤埃·努通
问题陈述: 目前的疟疾诊断方法需要采集血液来检测寄生虫。抽血需要经过培训的人员,并且会增加血源性传染病的风险。无创采样将大大提高偏远地区疟疾的诊断。唾液很容易获得且易于收集,但迄今为止尚未受到太多关注。PCR 等分子方法显示出使用唾液的巨大好处。但周转时间长、成本高且只能在设备齐全的实验室中使用,使得该技术不足以用于常规诊断。最近,开发了一种新的、快速、简单且灵敏的分子技术,称为环介导等温扩增(LAMP)。 方法论和理论方向:通过巢式 PCR、LAMP 和实时 (RT) LAMP 收集唾液和血液样本并进行分析,针对恶性疟原虫小亚基核糖体 RNA 基因 (18S rRNA) 的物种特异性核苷酸序列。
发现:
以血液巢式PCR为标准时,唾液和血液的LAMP检测灵敏度分别为43.90%、特异度分别为68.75%和57.62%。RT-LAMP 唾液和血液的敏感性分别为 49.38% 和 48.21%,特异性分别为 94.11% 和 66.67%。与标准唾液 PCR 相比,Saliva-LAMP 和 Saliva-RT-LAMP 的灵敏度分别为 70.23% 和 73.49%,特异性分别为 62.5% 和 76.47%。
结论及意义:
LAMP 和实时 LAMP 技术符合世界卫生组织关于发展中国家理想诊断测试的建议。考虑到LAMP技术的现场适应性和唾液采样的简便性,值得对该方法进行进一步研究,以更好地优化寄生虫DNA检测方案。