分枝杆菌病

分枝杆菌病
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国际标准期刊号: 2161-1068

抽象的

使用超声波作为分枝杆菌样品 MALDI-TOF MS 的快速预处理方法

新妻胜直、小芝静子、齐藤美和子、铃木智子、近松绢代、高木明子、御手洗聪

背景:在日本,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)作为一种简单而准确的分枝杆菌鉴定方法,但现有的预处理技术费时费力。
目的:我们表征了一种利用超声波破碎提取蛋白质的新预处理技术。
方法:我们将这种新技术与当前的预处理方法进行了比较,并检查了超声波的有用性,包括其在分枝杆菌灭活中的用途。共检测了174株分枝杆菌,其中结核分枝杆菌复合株50株、鸟分枝杆菌57株、分枝杆菌55株细胞内菌株和 12 种堪萨斯分枝杆菌菌株。超声预处理方法与目前的常规方法并行,在95℃下进行或不进行热处理30分钟。对于所有测试菌株,在比较新方法和传统方法时,分枝杆菌鉴定结果一致。
结果:与通过超声波处理和热预处理或通过常规方法制备的样品相比,通过不进行热预处理的超声波处理制备的样品表现出多个显着差异。但大部分得分都在2.0以上,最低得分超过1.7。此外,新技术只需10分钟即可完成诊断。此外,我们还证实,1 分钟的超声波预处理可使结核分枝杆菌复合菌株完全灭活。
结论:无需热预处理而通过超声波提取/灭活更快速的蛋白质的技术预计在临床实验室环境中非常有用。

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