色谱与分离技术杂志
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抗人 IgG-辣根过氧化物酶缀合物的制备及其在 ELISA 和蛋白质印迹实验中的应用

Ramesh Kumar K、Sneha Xiavour、Swarna Latha、Vijay Kumar 和 Sukumaran

我们的实验研究与酶与抗体的结合有关。这涉及酶和抗体之间形成稳定的共价连接。我们在这项研究中使用了不同的酶，这些酶的结合作用发生了变化。我们使用的酶——例如辣根过氧化物酶（HRPO）、脲酶或碱性磷酸酶。对酶和抗原特异性单克隆或多克隆抗体的研究，其中抗原结合位点和酶的活性位点均未发生功能改变。免疫试剂（抗体酶缀合物）制备中最常用的酶是辣根过氧化物。这种酶价格便宜，可以通过多种方法连接到免疫试剂上。此外，还有许多其显色底物可供选择。我们的辣根过氧化物酶（HRPO）与抗体（抗人IgG）缀合的实验研究将通过高碘酸氧化法进行。我们实验室已经制备了抗人 IgG-HRP 缀合物。这将用于 ELISA 和蛋白质印迹实验，从不同人血清样品中纯化的 IgG 将用作上述实验中的抗原。该实验分两个不同步骤进行：抗人 IgG-辣根过氧化物酶缀合物的制备、分离的人 IgG 的表征。