国际标准期刊号: 1948-5964
泽纳布·阿里·托基
凝集素是一种与碳水化合物特异性结合和交联的蛋白质,参与凝集素途径的激活,该途径被认为是先天性免疫和适应性免疫的一部分。凝集素在植物防御系统中也发挥作用。在本研究中,从大戟中分离出凝集素,并通过水萃取、硫酸铵沉淀、透析、superdex 75 过滤、SP-琼脂糖凝胶离子交换层析纯化。
研究表明,凝集素在浓度为50 μg/ml时对兔红细胞表现出血凝活性。凝集素在 60°C 之前仍保留这种血凝活性。还研究了 pH 值和变性剂对凝集素的影响,发现具有较低的 pH 范围 (6-8)。使用SDS凝胶电泳测定凝集素的分子量,发现其分子量为30KD,通过凝胶过滤测定其分子量为60KD,表明植物中的凝集素是同型二聚体。
还研究了使用 MTT 检测大戟对 vero 细胞系的细胞毒性,结果表明使用浓度直至 100 μg/ml 的大戟在安全范围内。还使用空斑减少测定和 MTT 测定了大戟凝集素对 Vero 细胞系上 HSV1 的抗病毒活性,结果显示 76% 的病毒抑制率。还使用MTT和RT-PCR研究了凝集素对HSV1的作用机制。
研究还表明,凝集素影响病毒的进入和附着阶段。当在感染 HSV1 之前将凝集素与 EDTA 结合时,这种病毒抑制作用完全减弱。
还通过 MTT 测定研究了大戟对人类癌细胞系的抗增殖活性。
通过PCR分离了编码凝集素的基因,这表明凝集素实际上是由多基因家族编码的。