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Parasporin 2Aa1 及其类似物衍生的肽对结肠癌 SW480 细胞的细胞毒活性

詹妮弗·克鲁兹

Parasporin-2 (PS2Aa1) 是苏云金芽孢杆菌产生的毒素它对 MOLT-4、Jurkat、Sawano 和 HepG2 等癌细胞系表现出高细胞毒性。因此，为了解释其细胞毒性作用，提出了一个多步骤机制模型：首先，PS2Aa1会与GPI锚定受体或膜上的其他蛋白质结合；然后，浓缩的毒素寡聚化，形成跨膜孔，对膜渗透性产生损害(1)。然而，其作用机制尚未完全阐明。因此，在这项研究工作中，我们通过Fmoc策略对PS2Aa1进行片段化，合成肽。我们获得了来自 PS2Aa1 不同结构域的 3 种肽，称为：P264-G274、Loop1-PS2Aa 和 Loop2-PS2Aa。此外，P264-G274 的 3 种衍生物（P264-V268K、P264-V268W 和 P264-V268H），获得了Loop1-PS2Aa的1个衍生物(Loop1-Y5K)和Loop2-PS2Aa的1个衍生物(Loop2-N4W)。每个残基的变化都得到了化合物电荷和疏水性增加的支持。 通过圆二色性（DC）光谱证实了肽的二级结构。PS2Aa1的所有肽均呈现α螺旋二级结构，在190 nm处有最大吸收带，在205-220 nm之间有两个最小吸收带。此外，测定了人红细胞的溶血程度，结果显示所有评估的肽的 HC ₅₀均低于 100 µM，与阳性对照 (TX-100 0.1 %) 相比，溶血率低于 24%。最后，全肽表现出针对 SW480 的活性；强调P264-V268K 是最活跃的，IC ₅₀为 5.716 μM。化疗药物5-氟尿嘧啶呈阳性控制。这些结果清楚地表明P264-V268K具有治疗SW480结肠癌细胞的强大能力，并且具有安全、选择性且可能是一种新的作用方式。