国际标准期刊号: 2155-9600
Zeynab Alborzi、Arash Zibaee、Samar Ramzi 和 Jalal Jalali Sendi
两半乳糖从立枯丝核菌菌核中纯化出特异性凝集素 RSAI 和 RSAII,并评估它们对菜粉蝶消化 α-淀粉酶的抑制作用。结果显示,RSAI 和 RSAII 的分子量分别为 16 和 15.7 kDa,IC50 抑制浓度分别为 0.87 和 1.68 mg/ml。在非变性 PAGE 实验中,两种 RSA 都会导致酶的 A2 带消失并降低 A1 带的清晰度。使用 Lineweaver-Burk 分析测定 α-淀粉酶动力学参数表明,与对照相比,两种凝集素均降低了 Vmax,而仅在 RSAII 存在的情况下 Km 才增加。因此,动力学参数分别表明对 RSAI 和 RSAII 的非竞争性抑制和混合抑制。此外,RSAI 和 RSAII 在最适合的 pH 和温度范围内表现出最高的抑制作用。对照组的酶活性,即 pH 值 9 (RSAI) 和 11 (RSAII) 以及温度 30°C 时。在 50、60 和 70°C 下孵育 RSA,显示出 RSAII 的高稳定性,而 RSAI 在 70°C 下失去抑制潜力。目前的研究结果清楚地表明 RSA 对甘蓝消化 α-淀粉酶的体外负面影响。