色谱与分离技术杂志
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人输尿管中卤常酮定量的 HPLC 方法：离体应用

Sassi A、Hassairi A、Kallel M、Jaidane M 和 Saad SAGUEM

开发了一种新的高效液相色谱方法来研究卤常酮在输尿管壁中的扩散。人输尿管提取物是通过胰蛋白酶消化组织，然后在沉淀蛋白质后使用异丙醇进行液-液提取来制备的。该方法使用反相 C18 柱，根据梯度程序将流动相输送至分析柱，起始成分为醋酸铵（pH 4.7；10 mM）-乙腈-三乙胺（70:30:0.2，v/ v/v) 和 11 分钟时线性变化至 90% 乙腈。液-液萃取被证明对 HFG 具有选择性，回收率高达 97.7%。通过应用新的验证方案，使用基于新概念（总误差）的准确度曲线，成功验证了 HPLC 方法。V4方案是根据SFSTP 2003委员会设计的算法选择的，有五个浓度水平和105次试验。可接受限度设定为±20%，而风险设定为5%。该方法在 0.2–10 μg/ml 的浓度范围内准确。HFG 的检测限为 0.06061 μg/ml。为了证明该方法在离体应用中的适用性，应用壁中 HFG 的定量来研究其在人输尿管中凝胶（0.03% w/w HFG）的分布 HFG 的检测限为 0.06061 μg/ml。为了证明该方法在离体应用中的适用性，应用壁中 HFG 的定量来研究其在人输尿管中凝胶（0.03% w/w HFG）的分布 HFG 的检测限为 0.06061 μg/ml。为了证明该方法在离体应用中的适用性，应用壁中 HFG 的定量来研究其在人输尿管中凝胶（0.03% w/w HFG）的分布