临床与实验心脏病学
开放获取

抽象的

绵羊心脏中心脏祖细胞的分离、表征和空间分布

侯旭伟、Nancy Appleby、Tania Fuentes、Lawrence D. Longo、Leonard L. Bailey 和 Nahidh Hasaniya 以及​​ Mary Kearns-Jonker

背景：实验室大型动物模型对于确定可转化为临床应用的干细胞疗法的功效非常重要。绵羊和人类心血管系统的相似性提供了使用绵羊作为大型动物模型来优化基于细胞的心脏治疗的机会。最近使用内源性心血管祖细胞进行的人类临床试验报告称，干细胞治疗后心脏功能显着改善。然而，迄今为止，尚未从绵羊心脏中分离出内源性心血管祖细胞。

方法：通过流式细胞术分离并克隆新生羊右心房表达SSEA-4、CD105和c-kit的心血管细胞。通过PCR鉴定克隆细胞中GATA-4、c-kit和Isl1的表达。采用免疫组化染色方法比较胎羊、新生羊和成年羊右心耳、右心房、左心室和心尖部SSEA-4阳性细胞的数量。还比较了胎儿、怀孕和非怀孕成年绵羊的 SSEA4+ 细胞数量。

结果：在绵羊体内鉴定出四种不同的心脏祖细胞亚群，包括CD105+SSEA-4+c-kit+Isl1+GATA-4+细胞、CD105+SSEA-4+c-kit+Isl1+GATA-4-细胞、CD105+SSEA-4-c-kit-Isl1+GATA-4-细胞和 CD105+SSEA-4-c-kit+Isl1+GATA-4-细胞。SSEA-4 的免疫组织化学染色显示，标记细胞在胎儿心脏的右心房中最为丰富，可以识别出祖细胞的微生境。

结论：我们确定了绵羊心脏中心脏祖细胞的表型和分布。来自绵羊的克隆内源心脏祖细胞将为优化绵羊模型心脏修复条件提供宝贵的资源。