威尔逊刘易斯曼陀罗1
细胞介导的对免疫刺激的反应通常位于炎症部位并涉及多种细胞类型。这些反应可以根据表达的细胞因子类型在单细胞水平上进行功能表征。在单细胞水平上测量抗原特异性细胞反应的能力是一种重要的工具，具有广泛的潜在应用，从疾病发病机制的研究到疫苗的评估。本研究进行了许多实验，以便建立刺激从健康成年马拉维参与者收集的血液样本中淋巴细胞和单核细胞体外产生细胞因子的最佳条件，以及各种细胞因子和细胞类型的最佳染色条件。不同的刺激方式和条件，
PMA加离子霉素的使用产生了最高的细胞因子产生T细胞，而LPS对于产生细胞因子的单核细胞来说是更好的刺激剂。全血刺激五小时对于 T 细胞中的细胞因子检测是最佳的，而四小时对于单核细胞来说是最佳的。研究发现，BFA 是比莫能菌素更好的高尔基体阻断剂，并且在静止状态下使用 15ml Falcon 型聚丙烯管可检测到最高比例的细胞因子产生细胞。发现 T 细胞主要产生 TNF-α、IFN-α 和 IL-2，而单核细胞主要产生 TNF-α 和 IL-6。2μl 抗 CD3-PerCP、2μl 抗 CD14-APC 和 4μl 抗细胞因子-PE 可获得最佳结果。与其他体积相比，当使用 2ml FACS 裂解溶液时，检测到细胞因子产量最高的单核细胞。