酶工程
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水性两相系统从红鲈 (Sebastes marinus) 胃中分离胃蛋白酶原：PEG 分子量和浓度的影响

丽莎·赵、Suzanne M Budge、Abdel E Ghaly*、Marianne S Brooks 和 Deepika Dave

鱼类加工废物可用于生产具有商业价值的副产品，例如胃蛋白酶原，其可用于食品、制造业、胶原蛋白提取、明胶提取以及调节消化率。一种重要的酸性蛋白酶胃蛋白酶是在鱼中合成和分泌的。胃膜处于非活性状态，称为胃蛋白酶原（PG）。在本研究中，使用由聚乙二醇（PEG）和盐在4℃下形成的水性两相系统（ATPS）对红鲈胃中胃蛋白酶原的纯化进行了优化。PEG分子量（PEG 1000）的影响研究了不同浓度（16%、18%、20%、22%、24%）对PG分配的影响，参数包括总体积（TV）、体积比（VR）、总酶活力（AE） 、蛋白质含量（Cp）、比酶活性（SA）、评估了分配系数（Kp）、纯化倍数（PF）和回收率（RY）。PEG 分子量和 PEG 浓度对每个参数也有显着影响。TV 和 VR 随着盐浓度的增加而降低，因为盐与水分子形成氢键并形成更紧凑和有序的水结构。由于其负电荷，PG 主要分配在富含 PEG 的顶部相中。AE、CP、SA、PF和RY随着盐浓度的增加而先增加后减少，而KP则相反。PEG 3000 (20%)、PEG 1000 (24%)、PEG 4000 (16%) 和 PEG 1000 (18%) 浓度分别给出最高的 TV、VR、CP 和 KP。浓度为 18% 的 PEG 1500 的 AE、SA、PF 和 RY 最高（86.2%）。浓度为 18% 的 PEG 1500 的 RY 最高（86.2%）。选取最佳的PEG分子量和PEG浓度。(NH4)2SO4 浓度为 15%，RY 最高（71.7%），被选为最佳盐类型和盐浓度。15%(NH4)2SO418%PEG 1500是最佳ATPS组合，并呈现出较好的分配效果。采用 ATPS 方法获得的 SA、PF 和 RY 值比采用硫酸铵分馏 (ASF) 方法获得的值高得多（SA 和 PF 为 2 倍，RY 为 1.2 倍）。