临床和细胞免疫学杂志
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使用新型 LipHsp70 ELISA 对肿瘤患者血液中的脂质体热休克蛋白 70 (Hsp70) 进行定量分析

斯蒂芬妮·布罗伊宁格、贾尼娜·埃尔、克莱门斯·纳普、索菲·冈瑟、伊冯娜·雷格尔、弗朗茨·罗德尔、乌多·S·盖普尔、Jun Thorsteinsdottir、莉迪亚·贾尼特拉帕尼、安妮·M·迪金森和加布里埃尔·穆尔特霍夫

据报道，许多肿瘤实体的外周循环中应激诱导的热休克蛋白 70 (Hsp70) 水平升高。与这些发现一致，我们发现 Hsp70 膜阳性肿瘤细胞在外泌体样脂质囊泡中主动释放 Hsp70。由于大多数商业 Hsp70 酶联免疫吸附测定 (ELISA) 未针对血清中脂质体 Hsp70 的检测进行验证，因此使用单克隆抗体 cmHsp70.1 作为检测试剂建立了 lipHsp70 ELISA。据报道，该抗体可识别活肿瘤细胞上游离的和膜结合的 Hsp70。
ELISA 验证显示在 0.36-17.4 ng/ml 浓度范围内具有较高的测定精度和线性度。对缓冲液和血清样品中加标 Hsp70 的回收率进行比较表明，与商业 ELISA 相比，使用 lipHsp70 ELISA 的回收率明显更高。对于脂质相关的 Hsp70，与商业 ELISA 相比，lipHsp70 ELISA 的回收率高出十倍。使用 lipHsp70 和对照 ELISA 对健康人类志愿者 (n=114) 的血液样本进行分析，结果显示平均血清 Hsp70 浓度分别为 6.4 ± 2.7 和 2.8 ± 1.3 ng/ml。未检测到 Hsp70 血清水平与年龄相关的显着差异。lipHsp70 ELISA 同样适用于血清和血浆，测量的 Hsp70 浓度不受食物摄入的影响，样品反复冻融或中度溶血。对头颈癌、肺癌、结直肠癌、胰腺癌、胶质母细胞瘤或血液恶性肿瘤患者与健康人类志愿者的 Hsp70 水平进行比较，发现肿瘤患者的 Hsp70 水平显着较高。
总之，lipHsp70 ELISA 提供了一种高度灵敏且稳健的方法来测量血清和血浆中的脂质体和游离 Hsp70，因此可以为肿瘤检测和监测患者的临床结果提供有用的工具。