糖类组学与脂质组学杂志
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幼仓鼠肾细胞中表达的 Fc 受体 IIIb 胞外区 N 联寡糖的位点特异性分类

加藤浩一

人 Fcγ 受体 III (FcγRIII) 由两个单独的基因编码的两种亚型组成：跨膜 FcγRIIIa 和糖基磷脂酰肌醇连接的 FcγRIIIb。两种异构体都可以以可溶形式 (sFcγRIII) 存在，由蛋白水解裂解产生的胞外区域组成。FcγRIII 介导的免疫功能，例如抗体依赖性细胞介导的细胞毒性和吞噬作用，很大程度上取决于 FcγRIII 分子的 N-糖基化。在我们之前的研究中，基于高效液相色谱的分析表明，幼仓鼠肾细胞中表达的人sFcγRIIIb的NA2等位基因释放的N-连接寡糖由高甘露糖型寡糖和核心岩藻糖基化复合型寡糖组成。在这里，我们通过液相色谱（LC）-电喷雾串联质谱分析结合内切糖苷酶处理，成功地将这种糖蛋白的 N-聚糖在六个 N-糖基化位点中的每一个位点分为这两种类型。我们的结果表明，sFcγRIIIb 的四个位点 Asn38、Asn74、Asn162 和 Asn169 仅表达复合型寡糖，而其余两个位点 Asn45 和 Asn64（两者在 NA1 等位基因中均不保守）不仅被占据复合型寡糖以及高甘露糖型寡糖，它们被认为参与 FcγRIIIb 与补体受体 3 型的相互作用。结合之前报道的重组 sFcγRIIIa 的位点特异性 N-糖基化分析，这项研究强调，在不同生产载体中生产的 sFcγRIIIa 和 sFcγRIIIb 均表达核心岩藻糖基化复合型寡糖作为 Asn74 和 Asn162 的主要糖型。这些发现为治疗抗体的设计和开发提供了见解，因为 Asn162 N-聚糖显着有助于免疫球蛋白 G 结合。