色谱与分离技术杂志

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国际标准期刊号: 2157-7064

抽象的

采用紫外检测器高效液相色谱法测定狗血浆中的别嘌呤醇和氧嘌呤醇:在药代动力学研究中的应用

戈多伊 ALPC、德热苏斯 C、德奥利维拉 ML、罗查 A、佩雷拉 MPM、拉兰吉拉 DF、兰乔特 VL、巴鲁安-梅洛 SM

开发并验证了具有紫外检测功能的高效液相色谱法(HPLC-UV),用于定量别嘌呤醇及其活性代谢物奥嘌呤醇;患有自然获得性人畜共患内脏利什曼病的狗血浆中。别嘌呤醇是黄嘌呤氧化酶的有效抑制剂;一种催化次黄嘌呤转化为黄嘌呤以及从黄嘌呤转化为尿酸的酶。在兽医学中,别嘌呤醇用于治疗犬内脏利什曼病。别嘌呤醇用于抑制利什曼原虫 RNA 的合成。为利用 HPLC-UV 流动相对狗血浆样品进行色谱分析而定义的条件由 0.1% 水、88% 甲酸和 0.25% 乙腈的混合物组成。在 LiChroCART 上分离别嘌呤醇和奥嘌呤醇® 125-4 LiChrospher ® 100 RP-8 (5 µm) 色谱柱,流速为 0.7 mL min -1,检测器操作波长为 254 nm。使用阿昔洛韦作为内标。HPLC-UV 方法的有效性由检测限和定量、线性、再现性和重复性决定。该方法对别嘌呤醇和奥昔嘌呤醇的定量下限均为 0.1 μg.mL -1 。浓度为 0.1-20.0 μg.mL -1时分析呈线性对于别嘌呤醇及其奥嘌呤醇。所有浓度的内流和间流精度值的系数变化低于 15%。HPLC-UV分析狗血浆中别嘌呤醇和奥昔嘌呤的置信限表明该方法适用于别嘌呤醇在狗体内的多剂量药代动力学研究。它高效、准确、灵敏。这项对患有 I 期和 II 期内脏利什曼病的狗进行别嘌呤醇和奥昔嘌呤药代动力学研究的研究得出了与健康狗调查相关的类似研究结果。

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