色谱与分离技术杂志
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抽象的

开发用于临床和运动检测应用的 COL3A1 特异性实时 PCR 检测

马丁内斯 B、希门尼斯 A、迪亚兹 T、塞古拉 J 和费罗 P*

PIIINP 的基因为 COL3A1，是一种用作生物标志物的蛋白质，在非酒精性脂肪肝等各种病理中发生改变，也可用于检测精英运动员滥用人类重组生长激素 (rhGH)，以改善健康状况。他们的表现。因此，除了其他用途外，对该蛋白质或其基因水平的研究还可用于这些病理的诊断。这项工作的目的是开发一种基于实时 mRNA 定量的 COL3A1 基因新检测方法。10名健康男性志愿者连续3天静脉注射0.026mg-1kg-1day-1person-1的rhGH，并在7天的不同时间采集血清和血液样本。按照标准方案纯化淋巴细胞后进行 mRNA 提取，使用专为该基因设计的 TaqMan 探针，通过实时定量 PCR 对样品进行定量。结果显示，COL3A1 表达增加，并在最后一次给药后 7 天的采样期间保持不变，与同一个体血清中 PIIINP 蛋白的定量相比，观察到更灵敏和稳健的结果。试验设置后，进行了部分验证，其中研究了线性、测定间和测定内变异、性别和年龄的影响、血液样本在 4°C 下储存的稳定性以及血液样本量等参数。与同一个体血清中 PIIINP 蛋白的定量相比，观察到更灵敏、更稳健的结果。试验设置后，进行了部分验证，其中研究了线性、测定间和测定内变异、性别和年龄的影响、血液样本在 4°C 下储存的稳定性以及血液样本量等参数。与同一个体血清中 PIIINP 蛋白的定量相比，观察到更灵敏、更稳健的结果。试验设置后，进行了部分验证，其中研究了线性、测定间和测定内变异、性别和年龄的影响、血液样本在 4°C 下储存的稳定性以及血液样本量等参数。