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萨希瓦尔（Bos indicus）奶牛泌乳不同阶段乳源性乳腺上皮细胞溶质载体（SLC2A）基因的表达分析

Pradeep J、Monika S、Ankita S、Umesh KS、Amit K、Ashok M、Mishra BP、Sandeep M、Kataria RS、Kaushik J 和 Mukesh M

溶质载体（SLC2A/GLUT）是转运蛋白超家族的主要类型之一，主要参与葡萄糖跨质膜的主动转运。乳腺上皮细胞（MEC）对葡萄糖的吸收是哺乳期乳汁合成的重要步骤，因此直接影响产奶量。据推测，使用从牛奶中分离的 MEC 是乳腺组织的良好替代品，以了解与哺乳相关的重要基因的表达谱，特别是有时难以获得活检的大型奶牛动物。因此，本研究在牛奶纯化的 MEC 中进行，以评估主要溶质载体/葡萄糖转运蛋白 (SLC2A/GLUT) 的相对 mRNA 表达，即 SLC2A1(GLUT1)、SLC2A(GLUT4)、SLC2A8(GLUT8)、SLC2A12(GLUT12)和己糖激酶(HK2)基因；萨希瓦尔奶牛泌乳早期（10-20 天）、高峰（30-50 天）、中期（100-140 天）和晚期（215-245 天）。使用涂有抗细胞角蛋白 18 抗体的 Dyna Beads 从新鲜牛奶中分离出 MEC。为了对 qPCR 表达数据进行标准化，评估了来自不同功能类别的 10 个已知管家基因 (HKG)。由四个最稳定的 HKG 组成的小组；通过 ge Norm、Norm Finder 和 Best Keeper 分析鉴定真核翻译延伸因子 1 α (EEF1A1)、核糖体蛋白 L4(RPL4)、3-磷酸甘油醛脱氢酶 (GAPDH)、肌动蛋白-β (ACTB)。与泌乳后期相比，SLC2A1在泌乳高峰/中期的表达水平显着升高（P<0.05）。相似地，哺乳中期SLC2A8 mRNA的表达量高于哺乳期其他阶段。相反，SLC2A4的表达水平在泌乳后期相对较高。另一方面，SLC2A12 mRNA 无法检测到，表明其在 Sahiwal 奶牛的 MEC 中表达非常低或不存在。我们的表达数据表明 SLC2A1、SLC2A4 和 SLC2A8 是 Sahiwal MEC 中的主要溶质载体。此外，HK2表达在哺乳早期和中期显着较高（P<0.05）。主要 SLC2A/GLUT 和 HK2 基因的阶段特异性表达表明它们在调节 Sahiwal 奶牛 MEC 中葡萄糖摄取的功能作用。另一方面，SLC2A12 mRNA 无法检测到，表明其在 Sahiwal 奶牛的 MEC 中表达非常低或不存在。我们的表达数据表明 SLC2A1、SLC2A4 和 SLC2A8 是 Sahiwal MEC 中的主要溶质载体。此外，HK2表达在哺乳早期和中期显着较高（P<0.05）。主要 SLC2A/GLUT 和 HK2 基因的阶段特异性表达表明它们在调节 Sahiwal 奶牛 MEC 中葡萄糖摄取的功能作用。另一方面，SLC2A12 mRNA 无法检测到，表明其在 Sahiwal 奶牛的 MEC 中表达非常低或不存在。我们的表达数据表明 SLC2A1、SLC2A4 和 SLC2A8 是 Sahiwal MEC 中的主要溶质载体。此外，HK2表达在哺乳早期和中期显着较高（P<0.05）。主要 SLC2A/GLUT 和 HK2 基因的阶段特异性表达表明它们在调节 Sahiwal 奶牛 MEC 中葡萄糖摄取的功能作用。