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荧光测定分泌性磷脂酶 A2 (sPLA2) 介导的人血清白蛋白与膜磷脂和脂肪酸的结合活性

Tsao FHC*、Xiang Z 和 Meyer KC

人血清白蛋白（HSA）是一种具有多种功能的复杂蛋白质，在器官系统稳态中发挥着关键作用。白蛋白水平的变化与危重疾病的恶化结果相关。然而，血清白蛋白的功能活性不能轻易确定以评估其治疗疾病的能力。开发了两种实时、灵敏的荧光脂质体测定法来测定 HSA 结合活性，一种用于测量白蛋白和膜磷脂 (PL) 之间的相互作用活性，另一种用于测量白蛋白与脂肪酸 (FA) 的结合。分泌性磷脂酶 A2 用作测定中的介质。灵敏而简单的荧光测定专门用于测量血清白蛋白与 PL 和 FA 结合的活性。在异质形式的白蛋白中，白蛋白的一小部分特定部分 (SFA) 是唯一与膜 PL 相互作用的部分，而所有部分都能够与 FA 结合。白蛋白的氧化或白蛋白与脂质体 PL 中 sPLA2 生成的 FA 和 lysoPL (LPL) 的预结合降低了白蛋白和 SFA 的结合能力。在肺炎和脓毒症患者的血清中，即使在调整血清白蛋白含量后，SFA 活性也消失，并且白蛋白-FA 结合活性比健康受试者低 50%。本研究表明，SFA-PL 和白蛋白-FA 结合测定可特异性确定白蛋白结合活性。这些测定可用于监测危重患者病理条件下血清白蛋白的结合能力。白蛋白的氧化或白蛋白与脂质体 PL 中 sPLA2 生成的 FA 和 lysoPL (LPL) 的预结合降低了白蛋白和 SFA 的结合能力。在肺炎和脓毒症患者的血清中，即使在调整血清白蛋白含量后，SFA 活性也缺失，白蛋白-FA 结合活性比健康受试者低 50%。本研究表明，SFA-PL 和白蛋白-FA 结合测定可特异性确定白蛋白结合活性。这些测定可用于监测危重患者病理条件下血清白蛋白的结合能力。白蛋白的氧化或白蛋白与脂质体 PL 中 sPLA2 生成的 FA 和 lysoPL (LPL) 的预结合降低了白蛋白和 SFA 的结合能力。在肺炎和脓毒症患者的血清中，即使在调整血清白蛋白含量后，SFA 活性也消失，并且白蛋白-FA 结合活性比健康受试者低 50%。本研究表明，SFA-PL 和白蛋白-FA 结合测定可特异性确定白蛋白结合活性。这些测定可用于监测危重患者病理条件下血清白蛋白的结合能力。即使在调整血清白蛋白含量后，SFA 活性不存在，白蛋白-FA 结合活性比健康受试者低 50%。本研究表明，SFA-PL 和白蛋白-FA 结合测定可特异性确定白蛋白结合活性。这些测定可用于监测危重患者病理条件下血清白蛋白的结合能力。即使在调整血清白蛋白含量后，SFA 活性不存在，白蛋白-FA 结合活性比健康受试者低 50%。本研究表明，SFA-PL 和白蛋白-FA 结合测定可特异性确定白蛋白结合活性。这些测定可用于监测危重患者病理条件下血清白蛋白的结合能力。