色谱与分离技术杂志
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凝胶过滤色谱技术作为家畜精浆蛋白简单研究的工具

瓦斯康塞洛斯·安德烈·贝利科·德、奥利维拉·贾米尔·西尔瓦诺·德和拉加雷斯·莫尼克·德阿尔伯克基

精液是精子的液体成分，为精子提供安全的环境。精浆具有许多其他体液所共有的特征，其特点是蛋白质的高动态范围，可以直观地显示精液的生理和生化过程。与其他体液一样，在精浆中区分蛋白质和非蛋白质很方便。除了传统现象外，分子排阻色谱技术还为组成蛋白的保存提供了重要要点；排除疏水相互作用可以提供更高分辨率的色谱图，并且不会提供蛋白质结构之间的非特异性相互作用。目的是简单研究家畜（种马、犬和山羊）精浆蛋白质的色谱图谱，通过凝胶过滤色谱技术。样品（精浆蛋白）在 Superose 12 HR 10/30 中进行色谱分析，在快速高效液相色谱（FPLC 系统）中在室温下用 25 mMTris-HCl (Sigma) 和 0.15 M NaCl (Sigma) 平衡，pH 7.4 ），使用0.5 mL.min-1的流速。存在分子量显着不同的分子分离，这使得分子量与洗脱体积之间的对数关系成为可能。凝胶过滤柱的校准得到方程y = ax + b，其中a和b的值分别为5.43和-2.175，相应的误差分别为0.115和0.256。大多数蛋白质分子质量的实验误差小于5%。