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JNK 介导的金雀异黄素 SREBP-2 处理上调 HepG2 细胞中的 LDLR 表达

李承民、韩惠媛、金允惠

金雀异黄素因其抗动脉粥样硬化作用而受到关注。我们研究了金雀异黄素对 HepG2 细胞中 LDLR（LDL 胆固醇受体）表达以及相关信号通路影响的分子机制。金雀异黄素以时间依赖性方式增加 LDLR 的 mRNA 和蛋白质水平。为了找出金雀异黄素对转录水平的影响，构建了含有 LDLR 启动子的荧光素酶报告基因构建体 (pLDLR-luc)，并检查其对金雀异黄素的反应。当 LDLR 启动子中的甾醇调节元件 (SRE) 被删除时，金雀异黄素增加了报告基因活性，但未能增加转录活性。通过染色质免疫沉淀测定 (CHIP)，金雀异黄素增加了 SREBP-2 的核转位以及 SREBP-2 与 LDLR 启动子的 DNA 结合活性。丝氨酸蛋白酶抑制剂 4-(2-氨基乙基)苯磺酰氟 (AEBSF) 的预处理可阻止金雀异黄酮的作用，而布雷菲德菌素 A 则不会导致内质网 (ER) 和高尔基体融合，这表明金雀异黄酮可能对 SREBP-2 从 ER 到高尔基体的运输有影响。金雀异黄素不会改变 Insig-1 蛋白水平。在丝裂原激活蛋白激酶 (MAPK) 中，金雀异黄素磷酸化 JNK，但不磷酸化 p38 和 ERK 信号。JNK 抑制剂 (SP600126) 消除金雀异黄素刺激的 LDLR 和核 SREBP-2 水平。为了最大限度地减少 c-Jun（一种由 JNK 信号激活的转录因子）的影响，构建了包含 SRE 但缺乏 c-jun 推定结合位点的截短 LDLR 荧光素酶构建体。金雀异黄素仍然能够增强截短的 LDLR 构建体的转录活性。添加胆固醇后，所有金雀异黄酮的作用均被消除。总之，金雀异黄素通过激活 JNK 信号和 SREBP-2 加工，进而上调 LDLR 来发挥抗动脉粥样硬化作用。然而，金雀异黄酮的有益作用可能会受到细胞胆固醇含量的影响。