糖类组学与脂质组学杂志
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无标记定量蛋白质组学方法揭示了水牛白血病抑制因子 (BuLIF) 在 COS-1 细胞中的多效性

苏达山·库马尔

白血病抑制因子（LIF）是一种多效性分子，它以依赖于环境的方式执行多种功能。牛 LIF (BuLIF) 是体外干细胞培养中必不可少的培养基成分，也被认为在妊娠早期至关重要。然而，除了 stat3 介导的干细胞多能性经典途径外，该分子的多种作用背后的确切分子机制尚不清楚。我们制备了稳定转染的 COS-1_BuLIF 细胞系，该细胞系在培养基中表达大量 LIF。通过 PCR 和测序证实 BuLIF 已整合到基因组中。我们发现 LIF 诱导圆顶状结构形成，这表明 BuLIF 通过 stat3 途径发挥作用。此外，从该细胞系中纯化出纯 rBuLIF，其大小为 58.99 kDa 和 48。分别具有和不具有糖基化的 9 kDa 蛋白质，经蛋白质印迹和 nLC-MS/MS 证实。纯化 LIF 的时间推移和浓度依赖性测定显示 72 小时时具有最大抑制作用，半最大有效浓度 (EC50) 为 0.0555 ng/mL，对应于 >1.6 的比活性