医学诊断方法杂志
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活性蓝 2 半透明染色后，人类精子中 DNA 的低密度区域显示为液泡

金子聪、吉田让二、高松清

人类精子通常含有液泡，因此有必要确定染色体区域的液泡是否导致DNA退化。为此，本研究开发了一种新颖的临床检查技术，即半透明染色，用于液泡的可视化。高度稀释的活性蓝2（RB2，100 pmol/L）对精子头部进行微弱染色，显露出带有无色调斑点的半透明蓝色体。微分干涉对比显示液泡为阴影浮雕图像。同样，视野中无色调斑点的定位和形状与阴影浮雕图像一致。

RB2 和 DNA 荧光染料的双重染色表明液泡可能包含空的或低密度的 DNA。目前的结果揭示了临床辅助生殖技术（ART）中的重要问题，即无论轮廓是否正常或运动性如何，都涉及多种液泡。特征分为三类：零个或一个小液泡；多个不同大小的零星空泡；和一个大液泡。此外，密度梯度离心和随后的游上等体外处理步骤无法分离出没有液泡的精子。

由于尚不清楚液泡是否只是将 DNA 推向周围而不对其造成损害，或者空白区域是否是 DNA 降解的结果，因此用于同时可视化轮廓和液泡的半透明染色构成了预 ART 的重要一步细胞诊断以确定精子群是否适合用于临床 ICSI。