国际标准期刊号: 2155-9600
约翰·J·吉尔迪亚、大卫·A·罗伯茨和扎卡里·布什
背景:紧密连接存在于上皮细胞中,并作为选择性看门人来调节吸收。PT-麦醇溶蛋白是一种麸质蛋白片段,已知会损害紧密连接的功能。本研究旨在探讨褐煤提取物膳食补充剂 (RESTORE) 对小肠 (IEC-6) 和结肠 (Caco-2) 上皮细胞紧密连接功能的影响。该研究还评估了相同补充剂的生物安全性,通过使用该补充剂处理的肠道和近端肾小管细胞培养物的细胞凋亡率来确定。
方法:孵育 IEC-6 和 Caco-2 细胞,直至测量到稳定的跨上皮电阻(TEER)。将 20% 浓度的膳食补充剂或对照置于细胞上并放置过夜。然后用或不用 PT-麦醇溶蛋白处理这些细胞。通过免疫荧光显微镜测定紧密连接表达。为了评估正常细胞系(IEC-6、Caco-2 和人肾近端小管细胞 (RPTC) 系)中的毒性浓度,在细胞培养物中确定了浓度为 20% 的褐煤提取物的细胞凋亡率。
结果:与对照相比,褐煤提取物补充剂增加了 IEC-6 (58%) 和 Caco-2 (15%) 的 TEER。PT-麦醇溶蛋白显着降低了对照 IEC-6 (49%) 和对照 Caco-2 (27%) 膜的 TEER。褐煤补充剂可防止 PT-麦醇溶蛋白介导的 TEER 降低。该补充剂减少了 RPTC (44%)、IEC-6 (13%) 和 Caco-2 (24%) 细胞培养物中的细胞凋亡。
结论:褐煤补充剂可阻断小肠和结肠细胞系膜中 PT-麦醇溶蛋白依赖性 TEER 降低。高浓度的褐煤提取物对肠或肾细胞没有毒性,并且显示 RPTC 细胞凋亡具有统计学显着性减少。需要进行人体临床试验来评估 RESTORE 的用途,以支持麸质敏感个体的健康。