临床化学与实验室医学杂志

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免疫印迹 SDS 页作为新生儿尿胱抑素 C 定性和定量测定方法的验证

A. Barbati、L. Cesarini、R. Pellegrino、GC Di Renzo、Chia Grenelli

目的:尿胱抑素 C (cyst-C) 的测定是早期识别新生儿肾功能损害倾向的一个非常好的方法。PETIA、PENIA和EIA是用于定量测定人体生物液中cyst-C的免疫分析方法,但它们存在一定的干扰,无法实现定性分析。本研究对用于分析尿囊肿-C 的免疫印迹 SDS-PAGE 进行了验证。
方法:从 S. Maria della Misericordia 医院的婴儿室收集新生儿的尿液。通过SDS-PAGE电泳、免疫印迹和光密度读数来研究尿囊肿-C。
结果:定性分析显示出两种不同的分子形式:所有样品中的反应性约为 70 KDa,有限数量的样品中的反应性为 13 KDa。测定精密度的变异系数为10%,测定准确度的变异系数为±10%;检出限为0.009 ng/μL,校准曲线线性良好(范围0.02-0.3 ng/μL)。如果对新鲜采集的尿液或样品解冻后立即储存长达六个月的尿液进行测定,即使不使用蛋白酶抑制剂,尿囊肿-C 的稳定性也是可接受的。
结论:免疫印迹SDS-PAGE分析是对尿囊肿-C进行定性和定量分析的有效方法。

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